SKIP000277
SKIP ID SKIP000277
Organism(En) -
Organism(Ja) -
Cell Type(En) -
Cell Type(Ja) -
Cell Tissue(En) -
Cell Tissue(Ja) -
Cell Origin Diseased
Cell Name 1(En) KO-001-25
Cell Name 1(Ja) KO-001-25
Cell Name 2(En) -
Cell Name 2(Ja) -
Disease Name 1(Ja) 統合失調症
ICD Code 1 F209
Disease Name 1(En) Schizophrenia
OMIM1 181500
Disease Name 2(Ja) -
ICD Code 2 -
Disease Name 2(En) -
OMIM 2 -
Disease Name 3(Ja) -
ICD Code 3 -
Disease Name 3(En) -
OMIM 3 -
Age -
Age Range 30-39
Sex Female
Race(En) -
Race(Ja) -
Genetic Diagnosis Yes
Not Detected No
Description(En) 22q11.2 deletion
Description(Ja) 22q11.2 欠損
Cell Morphology human ES-like
Grade --
Vector Retrovirus
Transgene pMXs-Oct3/4, pMXs-Sox2, pMXs-Klf4, pMXs-c-Myc
Adhesiveness Yes
Feeder Yes
Feeder Cell SNL 1.5x10^(6)/10cm dish, Mitomycin C treatment:400microG/ml, 2hr 15min
Medium DMEM/F12(SIGMA; D6421)
Genome Editing -
CO2 -
Mycoplasma -
Detection of Contaminants Mycoplasma -
Pluripotent Markers Yes
Pluripotent Markers Assay IHC
in vitro Differentiation Yes
in vitro Differentiation Assay IHC
in vivo Differentiation -
in vivo Differentiation Assay -
Other 1 Assay -
Other 1 Assay Method -
Other 2 Assay -
Other 2 Assay Method -
Other 3 Assay -
Other 3 Assay Method -
Karyotype -
Karyotype Assay -
Remaining Vector Detection -
Remaining Vector Detection Assay -
STR -
HLA -
Stem Cell Transcriptome analysis -
Stem Cell Transcriptome analysis Assay -
Author Name(En) Hideyuki Okano
--
Takeio Yoshikawa
Author Name(Ja) 岡野 栄之
--
吉川武男
Author Organization(En) Keio University
--
Riken Brain Science Institute
Author Organization(Ja) 慶應義塾大学
--
理研BSI
Author Contact Email
--
takeo[at]brain[dot]riken[dot]jp
PI Organization(En) Keio University
PI Organization(Ja) 慶應義塾大学
PI Name(En) Hideyuki Okano
PI Name(Ja) 岡野 栄之
PI Contact Email -
Availability Not Available
Provider Organization(En) Keio University
Provider Organization(Ja) 慶應義塾大学医学部
Provider Email akamatsu[at]a7[dot]keio[dot]jp
Provider URL -
Ethical Statement(En) -
Ethical Statement(Ja) -
Terms of Use(En) -
Terms of Use(Ja) -
PubMed ID 24389010
DOI 10.1016/j.neuron.2013.10.053
Title Increased l1 retrotransposition in the neuronal genome in schizophrenia.
Authors Bundo M, Toyoshima M, Okada Y, Akamatsu W, Ueda J, Nemoto-Miyauchi T, Sunaga F, Toritsuka M, Ikawa D, Kakita A, Kato M, Kasai K, Kishimoto T, Nawa H, Okano H, Yoshikawa T, Kato T, Iwamoto K
Journal Neuron
Year 2014
Volume 81
Issue 2
Pages 306-13
URL http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24389010
Free input -
Note 確定診断方法:DSM-IV(22q11.2 欠失はFISHにて確認)
HIV :
HTLV-1 :
HBV :
HCV :
その他の感染症 : 梅毒 陰性(梅毒定性RPR(ラテックス比濁法)、梅毒定性TP抗体(ラテックス比濁法)
病歴・治療歴等 : 28歳時、注意力の低下、記憶障害、独語、空笑、幻聴などの精神病症状が亜急性に出現。
        精神科受診し統合失調症との診断を受ける。非定型抗精神病薬等で治療した結果、独語、
        空笑等の症状は軽快した。
その他の既往歴 : VSD、口蓋裂(構音障害)、橋本病、学習障害
家族歴 : 特記事項なし。
飲酒・喫煙の嗜好歴 : なし
身体検査所見 : 長細い鼻、短い眼列という特徴的な顔貌あり。足指の短小化、肥満傾向あり。
       月経は正常。
臨床検査データ : VIQ 66, PIQ 54, Full IQ 57

維持培養方法
1.基本培地
 DMEM/F12(SIGMA; D6421)
2.血清: 使用しない
3.添加物: 使用する
 KockOutTM Serum Replecement(GIBCO; 10828-028) 20%
 Non Essential Amino Acid Solution(SIGMA; M7145) 10%
 b-mercaptoethanol(SIGMA; M7522) 0.1%
 200mM L-Glutamine(Nacalai tesque; 16948-04) 1%
 human-FGF basic(PEPRO TECH; 100-18B)4ng/mL
4.抗生物質(含抗真菌剤) : 使用する
 Penicillin/Streptomycin(Nacalai tesque; 26253-84) 0.5%
5.培養温度 : 37℃
6.CO2濃度 : 3.0%
7.培養容器 : 10 cm dish(日本ジェネティクス; FG-2090)
 コーティングの有無 : コーティングする
  Gelatin from porcine skin Type A(SIGMA; G2625)
8.Feeder Cellの使用: 使用する
 細胞名 : SNL細胞
 使用時の細胞密度 : 1.5 x 10^(6)/10cm dish
 使用前処理方法 : Mitomycin C処理 : 400microG/mL, 2hr 15min
9.継代方法
 [1]Aspirate medium.
 [2]Wash once with PBS.
 [3]Add Dissociation solution 1mL.
 [4]Aspirate Dissociation solution.
 [5]Incubate 7min at 37 degree.
 [6]Add 6ml Medium and collect colonies by mild pipetting.
 [7]Spin down at 160g 5min.
 [8]Aspirate supernatant and add appropriate volume of hiPS medium.
 [9]Dissociate colonies by Pipetting 5-6 times with 10ml pipette.(dissociate into small cell clamps)
 [10]Passage the cells 1:3-1:8. Culture at 37 degree, 3% CO2.

 *10mL plastic disposable pipette(greiner; 607160)
 *Dissociation solution
 2.5% Trypsin 5ml(GIBCO; 15090-046)
 1mg/mL Coll IV 5ml(GIBCO; 17104-019)
 1M CaCl2 0.05ml(Nacalai tesque; 06729-55)
 KSR 10ml(GIBCO; 10828-028)
 Total 50ml
 Aliquot and store at -20 degree
10.パッセージの際の細胞播種時の細胞密度
 Confluentの10cm dish 1枚から、10cm dish 3〜8枚にパッセージ
11.継代頻度 : コロニーが分化する直前 コロニーの中心および辺縁が茶色くなり始めた時点 4-6日に一回
12.その他

凍結保存方法 
・ガラス化法
 [1]Wash cells once with PBS, add and aspirate dissociation solution,
incubate 7min at 37 degree, and add 6mL of hiPS medium per 10cm dish.
 [2]Carefully detach colonies with cell scraper(keep original colony size).
 [3]Collect medium + colonies using 5mL pipette(grainer-important point).
 [4]Divide 6mL colony suspension into 2mL x 3 tupes(15mL falcons) and spin at 160 g for 5min at 4 degree.
 [5]Aspirate medium and put tubes with peletts on ice.
Freezing procedure:
 [6]Take 200 microL of freezing solution using a P1000 pipette, and reset the dial to around 300 microL.
 [7]Resuspend pellet and pipette once or twice and immediately transfer to cryotube.
 [8]Immediately transfer cryotube directly to flask containing liquid N2 for 15s abd drio the tupe into liquid N2.
 [9]Steps 8-9 must be performed within 15 seconds.

・Freezing solution(DAP213)
[1]0.59g 1M acetamide to 6mL of hiPS medium to 15ml tube
[2]Add 1.42mL 2M DMSO & 2.2mL Propylene glycol
[3]Measure up to the 10mL line by adding hiPS medium
Sterile filter through 0.2microM filters, Store at -80℃

Acetamide(SIGMA;A0500)
Dimethyl Sulfoxide(SIGMA;D5879)
Propylene glycol(SIGMA;398039)
0.2microM filter(Millipore;SLGV033RB) 

継代数 : 継代10回目

確認済の未分化マーカー
 Oct3/4 : ICC法
 Nanog : ICC法
 Tra-1-60 : ICC法

染色体解析 : 未実施
胚葉体形成実験 : 実施
テラトーマ形成実験 : 未実施 
in vitro分化能解析 : 実施
マイコプラズマ汚染検査 : 未実施
細胞同定検査(STR多型解析) :
クローニング :